花藥預(yù)培養(yǎng)也是一種有效的方法:將滅菌后的花藥懸浮在只含甘露醇的溶液中，預(yù)培養(yǎng)25天，取出花藥然后分離花粉進(jìn)行培養(yǎng)；或者在無(wú)菌條件下取出花藥在Nitsch等培養(yǎng)基中接種數(shù)天，然后分離花粉進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)，開(kāi)始小孢子發(fā)育,接種與培養(yǎng)花藥注意事項(xiàng)如下:①不要損傷花藥:如果花藥被損傷，很容易從損傷部位產(chǎn)生愈傷組織,各種植物花藥的最適培養(yǎng)時(shí)期不同，可根據(jù)花藥中花粉發(fā)育期與花蕾大小、外觀、顏色的相關(guān)性選擇材料。

-0/花粉培養(yǎng)中的預(yù)處理方法有暗處理、光質(zhì)處理、高滲處理、藥物處理和溫度處理。溫度處理包括高低溫處理、接種前處理和接種后處理。常用的方法是取適當(dāng)發(fā)育階段的花粉的花芽，放入冰箱(410攝氏度)冷藏115天。這種方法已經(jīng)在曼陀羅、仙女木、柑橘等幾種植物中得到證實(shí)。有些是接種后經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的低溫或高溫處理，如蕪菁花粉培養(yǎng)，即游離花粉在35攝氏度培養(yǎng)過(guò)夜，再轉(zhuǎn)移到25攝氏度，獲得較高頻率的胚狀體誘導(dǎo)。花藥預(yù)培養(yǎng)也是一種有效的方法:將滅菌后的花藥懸浮在只含甘露醇的溶液中，預(yù)培養(yǎng)25天，取出花藥然后分離花粉進(jìn)行培養(yǎng)；或者在無(wú)菌條件下取出花藥在Nitsch等培養(yǎng)基中接種數(shù)天，然后分離花粉進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)，開(kāi)始小孢子發(fā)育。材料的消毒類(lèi)似于一般的組織培養(yǎng)，但培養(yǎng)過(guò)程類(lèi)似于懸浮培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)，操作過(guò)程復(fù)雜，必須嚴(yán)格控制

用作花藥接種時(shí)花粉的基因型、生長(zhǎng)和發(fā)育階段對(duì)花藥培養(yǎng)有直接影響，尤其是花粉的發(fā)育階段，是花藥培養(yǎng)成敗的關(guān)鍵。實(shí)驗(yàn)表明花藥從減數(shù)分裂期到雙核期可能誘導(dǎo)體外孤雌發(fā)育。對(duì)大多數(shù)植物來(lái)說(shuō)，最適宜的時(shí)期是中期到后期。各種植物花藥的最適培養(yǎng)時(shí)期不同，可根據(jù)花藥中花粉發(fā)育期與花蕾大小、外觀、顏色的相關(guān)性選擇材料。一般在花藥接種前，對(duì)花粉發(fā)育時(shí)期進(jìn)行鑒定，以找出該植物小孢子發(fā)育的細(xì)胞學(xué)指標(biāo)與花蕾發(fā)育的形態(tài)學(xué)指標(biāo)之間的相關(guān)性，以便于接種和取材。芽的大小因品種、發(fā)育狀況、氣溫變化、灌溉與否而異，需要根據(jù)具體情況進(jìn)行多重鑒定。確定花粉發(fā)育時(shí)期的主要方法是涂片法，用醋酸品紅或克百威或黃鉀鐵礬-蘇木精作染色液。

接種與培養(yǎng)花藥注意事項(xiàng)如下:①不要損傷花藥:如果花藥被損傷，很容易從損傷部位產(chǎn)生愈傷組織。②徹底去除花絲:花藥與花絲相連不利于愈傷組織或胚狀體的形成，需要徹底去除花絲。(3)幼苗形成后需要光照:幼苗形成后需要光照產(chǎn)生葉綠素，葉綠素由異養(yǎng)轉(zhuǎn)化為自養(yǎng)。花藥培養(yǎng)是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，通過(guò)無(wú)菌操作技術(shù)，將已發(fā)育到一定階段的花藥接種到人工培養(yǎng)基中，從而改變花藥中花粉粒的發(fā)育程序，誘導(dǎo)其分化，繼續(xù)有絲分裂形成細(xì)胞團(tuán)，進(jìn)而形成未分化團(tuán)。

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