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基因測序技術,什么是基因測序

來源:整理 時間:2023-01-28 18:44:25 編輯:好學習 手機版

1,什么是基因測序

基因測序是一種新型基因檢測技術,能夠從血液或唾液中分析測定基因全序列,預測罹患多種疾病的可能性,個體的行為特征及行為合理。基因測序技術能鎖定個人病變基因,提前預防和治療。 基因測序相關產品和技術已由實驗室研究演變到臨床使用,可以說基因測序技術,是下一個改變世界的技術。

什么是基因測序

2,什么是基因測序

DNA測序的方法有很多種. 目前最常見的是雙脫氧終止法了. 在測序用的緩沖液中含有四種dNTP及聚合酶. 測序時分成四個反應, 每個反應除上述成分外分別加入2,3-雙脫氧的A, C, G, T核苷三磷酸(稱為ddATP, ddCTP, ddGTP, ddTTP), 然后進行聚合反應. 在第一個反應物中, ddATP會隨機地代替dATP參加反應一旦ddATP加入了新合成的DNA鏈, 由于其3位的羥基變成了氫, 所以不能繼續延伸. 所以第一個反應中所產生的DNA鏈都是到A就終止了; 同理第二個反應產生的都是以C結尾的; 第三個反應的都以G結尾, 第四個反應的都以T結尾, 電泳后就可以讀出序列了. 也許這樣說你不一定明白. 舉一個例子, 假如有一個DNA, 互補序列是GATCCGAT, 我們試著做一下: 在第一個反應中由于含有dNTP+ddATP, 所以遇到G, T, C三個堿基時沒什么問題, 但遇到A時, 摻入的可能是dATP或ddATP, 比如已合成到G, 下一個如果參與反應的是ddATP則終止, 產生一個僅有2個核苷酸的序列: GA, 否則繼續延伸, 可以產生序列GATCCG, 又到了下一個A了. 同樣有兩種情況, 如果是ddATP摻入, 則產生的序列是GATCCGA, 延伸終止, 否則可以繼續延伸, 產生GATCCGAT. 所以在第一個反應系統中產生的都是以A結尾的片段: GA, GATCCGA, 同理在第二個反應中產生的都是以C結尾的片段: GATC, GATCC, 在第三個反應中產生的都是以G結尾的片段: G, GATCCG 在第四個反應中產生的都是以T結尾的片段: GAT, GATCCGAT, 電泳時按分子量大小排列, A反應的片段長度為2, 7; C反應的為4, 5; G反應的為1, 6; T反應的為3, 8, 四個反應的產物分別電泳, 結果為 8 7 6 5 4 3 2 1 A | | C | | G | | T | | 我們可以從右向左讀, 為GATCCGAT, 至此, 測序完成

什么是基因測序

3,這句話是什么意思關于基因測序技術

上面這段話是普通二代測序(454測序法)的原理,不同的熒光信號表示不同的堿基。你說的沒錯,測序結果返還給客戶的時候一般都有兩個文件,一個是Seq,一個是ab1,其中ab1這個文件就是測序峰圖,測序結果就是根據峰圖確定的。你也可以自己嘗試檢查這個峰圖,來確定有些檢測是不是測出來了,但是轉換錯了。~.~有問題我們可以繼續交流。

這句話是什么意思關于基因測序技術

4,什么是DNA測序技術

DNA測序技術,即測定DNA序列的技術。在分子生物學研究中,DNA的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用于測序的技術主要有Sanger等(1977)發明的雙脫氧鏈末端終止法和 Maxam和 Gilbert(1977)發明的化學降解法。這二種方法在原理上差異很大,但都是根據核苷酸在某一固定的點開始,隨機在某一個特定的堿基處終止,產生 A,T,C,G四組不同長度的一系列核苷酸,然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進行檢測,從而獲得DNA序列。目前 Sanger測序法得到了廣泛的應用。http://baike.baidu.com/link?url=S8neqboyOrwW895RyI0CjFWkb6Wt2g6Hjabexm7DcZS8SDM5BR0UQex9rxvJPDkqMVO-Dk9S-PMsU4supZ5xna
bac是細菌人工染色體意思,之所以有bac文庫的出現,是因為基因組序列太長,測序,以及篩選基因等沒有辦法完成,所以將基因組片段隨機打斷成片段,連到載體上構建成一系列的重組子,這樣當你需要特定的序列,只需要篩選出自己要的那個bac重組子就行了。說的有點過于簡單,不知道你能明白否?末端測序也是采用的雙脫氧終止法的。雙脫氧終止法的原理是;堿基之間是通過倆個堿基的5磷酸基團和3羥基連接的,雙脫氧終止法就是利用了這個3羥基,將3羥基脫氧變成氫鍵,那么這樣下一個堿基的5磷酸基團就沒有辦法連到前一個堿基上了。所以如果在做測序pcr的時候加一部分正常的dntp(3號位為羥基),加一定量的ddntp(2,3號位都是氫鍵),那么在第一個堿基后如果接上去的是dntp,那么就可以接著連第三個堿基,如果連得是ddntp,那么就沒有辦法連下個堿基形成鏈終止,在測序pcr中,數以萬計的反應,那么就會出現2個堿基后終止的鏈,也有可能出現3個,4個,n個堿基后終止的鏈,這樣就形成了一系列從一個堿基到n個堿基的序列(其最后一個堿基都是三號位為氫鍵的,這個應該理解吧)。那么如果我們在連上去的ddntp上連上個熒光基團(四種ddntp連上不同的熒光基團),那么將這一系列長度的鏈跑膠,會形成一系列的帶,通過每條帶最后一個堿基的熒光通過機器就能夠區分是什么堿基,將這些堿基拼接好后就是你要的序列了。
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