分子克隆一般需要在引物上加上限制性堿基序列(6-8個(gè)堿基2-6個(gè)保護(hù)性堿基)，在引物的5’端加上這些堿基還是會(huì)影響PCR擴(kuò)增，有時(shí)會(huì)擴(kuò)增不出來(lái)，所以先用沒(méi)有限制性序列的引物進(jìn)行一輪擴(kuò)增,在分子的水平上提供了用于純化和擴(kuò)增特定DNA片段的方法,Gene克隆是一個(gè)比較直觀簡(jiǎn)單的操作程序,意義與應(yīng)用-1克隆技術(shù)是在20世紀(jì)70年代發(fā)展起來(lái)的，它的出現(xiàn)和應(yīng)用開(kāi)辟了分子基因研究的新領(lǐng)域，打開(kāi)了人類認(rèn)識(shí)、識(shí)別、分離和改造基因，創(chuàng)造新物種的大門。1、分子克隆中常用的連接方法方法:DNA片段的制備，載體的選擇，片段與載體...